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澳洲胎牛血清為何不適合用高溫滅菌?
發(fā)布時(shí)間: 2025-03-12 點(diǎn)擊次數(shù): 4次在生物醫(yī)學(xué)研究與生物制藥領(lǐng)域,澳洲胎牛血清常作為細(xì)胞培養(yǎng)關(guān)鍵成分被廣泛應(yīng)用,然而其并不適合用高溫滅菌,背后原因值得深究。胎牛血清富含多種對(duì)細(xì)胞生長、增殖至關(guān)重要的生物活性物質(zhì),如生長因子(胰島素樣生長因子、表皮生長因子等)、激素(類固醇、甲狀腺素等)、維生素以及復(fù)雜蛋白質(zhì)體系。高溫滅菌通常需121℃、1.05kg/cm²壓力維持15-30分鐘,這般劇烈條件會(huì)使這些生物活性物質(zhì)遭受嚴(yán)重破壞。以生長因子為例,其空間結(jié)構(gòu)由氫鍵、二硫鍵、疏水相互作用維系,高溫下氫鍵斷裂、二硫鍵錯(cuò)配,分子解離為無活性肽段,細(xì)胞接收不到生長“信號(hào)”,生長受阻甚至凋亡,細(xì)胞培養(yǎng)也就失去了意義。從免疫學(xué)特性考量,胎牛血清含特殊免疫球蛋白、補(bǔ)體成分,低溫保存時(shí)可保持一定免疫功能,輔助細(xì)胞抵御外來病原體。高溫處理會(huì)令免疫球蛋白變性沉淀,補(bǔ)體激活失控,不僅喪失原有免疫調(diào)節(jié)功能,還可能引發(fā)細(xì)胞毒性反應(yīng),干擾細(xì)胞正常代謝,使細(xì)胞生存微環(huán)境惡化。再者,血清中蛋白質(zhì)構(gòu)成復(fù)雜且微妙平衡,高溫致使蛋白質(zhì)展開、聚集、沉淀,改變?nèi)芤簼B透壓與離子強(qiáng)度。滲透壓失衡影響細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換,細(xì)胞或因過度吸水膨脹破裂,或失水皺縮功能受損;離子強(qiáng)度改變干擾細(xì)胞膜電位穩(wěn)定,影響神經(jīng)傳導(dǎo)、物質(zhì)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)等生理過程,最終細(xì)胞無法正常貼壁、分裂、分化。另外,高溫促使血清內(nèi)脂質(zhì)氧化,產(chǎn)生大量氧自由基與過氧化物,它們具有細(xì)胞毒性,攻擊細(xì)胞膜脂質(zhì)雙分子層、核酸、蛋白質(zhì),破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性,阻斷細(xì)胞生命進(jìn)程,讓細(xì)胞培養(yǎng)功虧一簣。澳洲胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)“養(yǎng)分”與“保護(hù)劑”,高溫滅菌無異于打破其營養(yǎng)與功能“生態(tài)”,致使細(xì)胞生長雪崩式崩塌。在實(shí)際操作中,多采用過濾除菌等溫和方式保障血清無菌,維護(hù)細(xì)胞培養(yǎng)體系穩(wěn)定,足見精準(zhǔn)把控胎牛血清處理細(xì)節(jié)對(duì)生物科研、產(chǎn)業(yè)前行之關(guān)鍵。
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